罗非鱼湖病毒（TiLV）是一种新型的RNA病毒类似正粘病毒。据报道，作为一种新兴的病毒引起罗非鱼（SHT）在以色列，厄瓜多尔，哥伦比亚和埃及（弗格森等人的合胞肝炎2014; Eyngor等2014;巴哈拉赫等人2016年，德尔 - 波索等人2017年，法特希等人2017）。本病引起的大量死亡高达90％，在养殖罗非鱼，被认为是全球罗非鱼养殖的潜在威胁（Eyngor等人。2014）。

在泰国的罗非鱼养殖场，疾病的暴发最近发生高累积死亡率（20-90％）有关，我们发现病鱼表现SHT的典型组织病理学特征。感染已被证实透射电子显微镜（TEM），在从以色列原位杂交和高核苷酸序列同一性TiLV（Dong等人。2017年）。我们的研究进程通过使用先前由Eyngor等发表巢式RT-PCR引物序列的延迟。（2014）与后由Tsofack等人发布的详述RT-PCR方案在一起。（2016）。我们的初步检测测定使用具有假定PCR条件早期报告（Eyngor等人2014）（在出版物中未指定）导致的非特异性鱼基因扩增进行。这可能是由于一个事实，即13-18出的20个核苷酸的引物“嵌套EXT-2”匹配的鱼的基因。因此，我们修改了巢式RT-PCR方案成半巢式RT-PCR通过省略引物“嵌套EXT-2”，以避免假阳性结果。

下面给出的半巢式RT-PCR方案可自由地用于非商业应用，以检测TiLV。重感染的样品将产生415 bp和250bp的扩增子2个频带同时轻轻感染的样品将产生单一的250-bp的扩增条带（图1）。由于这是TiLV在亚洲的第一份报告，作者敦促亚洲鱼类健康实验室测试TiLV当罗非鱼死亡率异常发生。请联系Centex的虾（saengchan“在” biotec.or.th）获得阳性对照质粒（的pGEM-415_bp），这将用于非商业组织提供免费和收费的私营部门。